一、滅菌操作
1. 關(guān)閉所有供水管路及空氣管路。開(kāi)啟蒸汽管路閥門(mén)。同時(shí)稍開(kāi)啟發(fā)酵罐夾套的排氣閥門(mén),排放夾套剩水。
2. 開(kāi)啟發(fā)酵罐攪拌電機,轉速至200rpm,使發(fā)酵液受熱均勻。當溫度升到95℃以上時(shí),即可停止攪拌。然后待溫度升至121℃(罐壓在0.1~0.12Mpa)時(shí)即可計時(shí)開(kāi)始。
3. 當計時(shí)開(kāi)始后,發(fā)酵時(shí)間一般為20-30分鐘。在此時(shí)間內應保證溫度不低于120℃.同時(shí)可進(jìn)行空氣過(guò)濾器及空氣管道的滅菌。
4. 空氣過(guò)濾器及空氣管道的滅菌:稍開(kāi)過(guò)濾器的排水閥門(mén),及空氣管道的隔膜閥,保證空氣管道的蒸汽滅菌。但不能開(kāi)的太大,以免蒸汽大量進(jìn)入罐內,而稀釋培養基。
5. 出料、采樣閥的蒸汽閥門(mén)及出口閥稍開(kāi),保證該管路滅菌。在發(fā)酵罐的蓋上的接種口,同樣需要放氣,使其達到滅菌要求。
6. 當保溫結束時(shí),應先把空氣管路中的隔膜閥關(guān)閉。把空氣過(guò)濾器排水閥關(guān)閉,以及關(guān)閉取樣閥出口閥門(mén)和接種口螺帽。然后再關(guān)閉各路蒸汽閥門(mén)。
7. 打開(kāi)冷卻水閥門(mén)及排水閥門(mén),同時(shí)打開(kāi)空氣流量計和空氣放空閥門(mén),把空氣過(guò)濾器吹干。此時(shí)必須注意罐壓的變化。不能讓罐壓低于0.02Mpa。及當罐壓達到0.05Mpa時(shí),立即將空氣管路打開(kāi),保證發(fā)酵罐的罐壓在0.05Mpa左右。
8. 當溫度降到95℃時(shí),即可打開(kāi)攪拌。當溫度低于50℃后,即可切入自動(dòng)控溫狀態(tài),使培養基達到接種溫度,滅菌過(guò)程即告結束。